ESTRUCTURA DE UN LABORATORIO, SUS ÁREAS Y LOS DIFERENTES ANÁLISIS QUE SE REALIZAN (NOM-166-SSAL-1997) PRACTICAS DE LABORATORIO POR ÁREAS (CONTINUACIÓN DE PUBLICACIÓN ANTERIOR)

Área de química clínica; determinación de creatinina en suero. 

PRINCIPIO DEL MÉTODO
 El ensayo de la creatinina esta basado en la reacción de la creatinina con el picrato alcalino descrito por Jaffé.
La creatinina reacciona con el picrato alcalino formando un complejo rojizo. El intervalo de tiempo escogido para las lecturas permite eliminar gran parte de las interferencias conocidas del método.
La intensidad del color formado es proporcional a la concentración de creatinina en la muestra ensayada  

SIGNIFICADO CLÍNICO
La creatinina es el resultado de la degradación de la creatina, componente de los músculos y puede ser transformada en ATP, fuente de energía para las células.
La producción de creatinina depende de la modificación de la masa muscular. Varía poco y los niveles suelen ser muy estables.
Se elimina a través del riñón. En una insuficiencia renal progresiva hay una retención en sangre de urea, creatinina y ácido úrico.
Niveles altos de creatinina son indicativos de patología renal 1,4,5 .


El diagnóstico clínico debe realizarse teniendo en cuenta todos los datos clínicos y de laboratorio.

PRECAUCIONES  
Hidróxido sódico: Irritante (Xi): R36/38: Irrita ojos y la piel. S26: En caso de contacto con los ojos, lavar de inmediato con abundante agua y acudir al medico. S37/39: Usar guantes adecuados y proteger cara y ojos. S45: En caso de accidente o malestar, acudir inmediatamente al médico.

PREPARACIÓN  Reactivo de trabajo (RT): Mezclar volúmenes iguales de R 1 Reactivo Pícrico y de R 2 Reactivo Alcalinizante.  Estabilidad del reactivo de trabajo: 10 días a 15-25ºC.  

CONSERVACIÓN Y ESTABILIDAD  Todos los componentes del kit son estables, hasta la fecha de caducidad indicada en la etiqueta, cuando se mantienen los frascos bien cerrados a 2-8ºC, protegidos de la luz y se evita su contaminación. No usar reactivos fuera de la fecha indicada.

CREATININE CAL  

Una vez abierto, es estable 1 mes si se mantienen los viales bien cerrados a 2-8ºC, protegidos de la luz y se evita su contaminación.  

Indicadores de deterioro de los reactivos:   

- Presencia de partículas y turbidez.   

- Absorbancia (A) del Blanco a 492 nm 1,80. ≥   

MATERIAL ADICIONAL   

- Espectrofotómetro o analizador para lecturas a 492 nm.   

- Cubetas de 1,0 cm de paso de luz.   

- Equipamiento habitual de laboratorio.   

MUESTRAS   

- Suero o plasma heparinizado

       Estabilidad de la creatinina: al menos 24 horas a 2-8ºC. 

- Orina 1 : Diluir la muestra al 1/50 con agua destilada. Mezclar. Multiplicar el resultado obtenido por 50 (factor de dilución)  

Estabilidad de la creatinina: 7 días a 2-8ºC.   

PROCEDIMIENTO   

1. Condiciones del ensayo:  

Longitud de onda: . . . . . . . . . . . . . . . 492 nm (490-510)  

Cubeta:. . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . .. .1 cm paso de luz  

Temperatura. . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . 37ºC / 15-25ºC  

2. Ajustar el espectrofotómetro a cero frente al blanco de reactivo.  

3. Pipetear en una cubeta:   

4. Mezclar y poner en marcha el cronómetro.   

5. Leer la absorbancia (A 1 ) al cabo de 30 segundos y al cabo de 90 segundos (A

2 ) de la 

adición de la muestra.  

6. Calcular: ΔA= A 2 – A 1 .   

CÁLCULOS  

                               PatrónΔAMuestraΔAx 2 (Conc. Patrón) = mg/dL de creatinina en la muestra  Factor de conversión: mg/dL x 88,4= μmol/L.  

CONTROL DE CALIDAD  

Es conveniente analizar junto con las muestras sueros control valorados:  SPINTROL H Normal y Patológico (Ref. 1002120 y 1002210).  Si los valores hallados se encuentran fuera del rango de tolerancia, revisar el instrumento, los reactivos y el calibrador. Cada laboratorio debe disponer su propio Control de Calidad y establecer correcciones en el caso de que los controles no cumplan con las tolerancias.   

VALORES DE REFERENCIA 

                                                                              Suero o plasma: 

                                                                              Hombres  0,7 - 1,4 mg/dL 61,8 - 

                                                                                               123,7 μmol/L ≅ 

                                                                              Mujeres  0,6 - 1,1 mg/dL 53,0 - 

                                                                                             97,2 μmol/L ≅ 

                                                                              Orina: 15-25 mg/Kg/24 h  

                                                                              Hombres 10 - 20 mg/Kg/24 h 88 - 

                                                                                              177 μmol/Kg/24 h ≅  

                                                                              Mujeres  8 -18 mg/Kg/24 h 71 - 

                                                                                             177 μmol/Kg/24 h ≅ 

Estos valores son orientativos. Es recomendable que cada laboratorio establezca sus propios valores de referencia.


CARACTERÍSTICAS DEL MÉTODO  
Rango de medida: Desde el límite de detección de 0,09 mg/dL hasta el límite de linealidad de        15 mg/dL.
Si la concentración es superior al límite de linealidad, diluir la muestra 1/2 con ClNa 9 g/L y multiplicar el resultado final por 2.  

        Precisión: 

    Sensibilidad analítica: 1 mg/dL = ΔA 0,03 A/min . mg/dL

Exactitud: Los reactivos de SPINREACT (y) no muestran diferencias sistemáticas significativas cuando se comparan con otros reactivos comerciales (x).
  Los resultados obtenidos con 50 muestras fueron los siguientes:
  Coeficiente de correlación (r): 0,986
 Ecuación de la recta de regresión: y= 0,975x + 0,047
  Las características del método pueden variar según el analizador utilizado.  


INTERFERENCIAS
Hemoglobina (1 g/L), Bilirrubina (55 mg/dL), interfiere.    
Se han descrito varias drogas y otras substancias que interfieren en la determinación de la creatinina